Istilah kanker berasal dari bahasa latin yang artinya adalah
kepiting. Penyakit keganasan, kanker, diibaratkan seperti capit-capit
lengan kepiting oleh seorang Hippocrates, yang mengamati bahwa penyakit
kanker dapat menyebar didalam tubuh dan biasanya berakhir pada kematian.
Apakah sel kanker itu? Secara umum sel kanker didefinisikan sebagai sel yang tidak normal, yang tumbuh serta berkembang biak secara cepat dan tidak terkendali. Sel kanker tidak peduli dengan keterbatasan zat makanan, ruang dan fakta kalau mereka harus berbagi dengan sel-sel normal yang ada disekitarnya. Lebih jauh dari pada itu, mereka mengabaikan perintah untuk berhenti berbiak oleh tubuh yang bersangkutan.
Sel tubuh yang normal juga tumbuh, membelah diri dan pada saat tertentu mereka akan mati. Akan tetapi pada sel kanker, mereka terus tumbuh, memperbanyak diri dan berusaha menghindari kematiannya (apoptsis), lebih buruknya lagi kecepatan pertumbuhan sel kanker jauh melebihi sel-sel yang normal.
Secara garis besar kanker dibagi menjadi dua kelompok, yaitu kanker jinak dan kanker ganas. Kanker jinak (benign) memiliki kecenderungan untuk tumbuh lebih lambat daripada kanker ganas (malignant) dan mereka tidak menyebar ke organ lain di dalam tubuh. Sedangkan, kanker ganas memiliki pertumbuhan sel yang sangat cepat, dapat menginvasi serta menghancurkan jaringan di sekitarnya dan pada fase tertentu akan menyebar ke organ-organ lain di dalam tubuh.
Pertanyaannya adalah, bagaimana sel kanker ini dapat tumbuh dan berjalan lebih cepat daripada sel normal, yang pada akhirnya mereka akan mencari pembuluh darah atau lymph untuk selanjutnya menyebar ke organ tertentu didalam tubuh (metastasis)?
Ada tiga tipe gen yang bertanggung jawab atas proses seperti yang tersebut diatas, yaitu: gen-gen yang jahat (oncogenes), gen-gen yang baik (tumor suppressor genes) dan gen-gen yang berfungsi memperbaiki gen lain yang rusak (mismatch-repair genes).
Sel Berjalan (The Crawling Cells)
Terbentuknya sel kanker dan kemampuannya untuk ‘berjalan’, metastasis, adalah suatu proses yang sangat kompleks, yang melibatkan banyak gen di dalamnya. Pada perjalanannya, satu sel kanker harus melepaskan diri dari kelompoknya (primary tumor) untuk mengadakan invasi ke daerah di sekitarnya, berusaha menembus pembuluh lymph atau secara langsung mencari pembuluh darah, berjuang melawan proses pertahanan tubuh (hos immune defense), berhenti di organ tujuannya dan memulai berkembang biak di lingkungan barunya (secondary tumor) [1].
Dari sekian banyak oncogene yang berperan dalam proses metastasis, Ras-superfamily dari small GTP-binding proteins merupakan yang paling banyak dipelajari. Ras-superfamily terdiri dari 130 members diantaranya Ras, Rho, Arf/Sar 1 dan Rab/Ran-subfamilies[2]. Semua aspek dari sel berjalan, invasi, termasuk didalamnya polarisasi dari sel, remodeling cytoskeletal dan penerimaan signal-signal keganasan dari luar sel dikendalikan oleh Rho-GTPases[3].
Rho-GTPases subfamily terdiri dari monomeric GTP-binding proteins dengan berat molekul rendah, ~20-30 kilo-Dalton (kDa), yang pada sel fibroblast normal juga sangat dibutuhkan untuk sel bermigrasi, akan tetapi over-ekspresi dari protein-protein ini akan merangsang sel-sel epitel untuk bermigrasi pula [4].
Rho Protein
Ada tiga kelas Rho family yang paling banyak dipelajari, RhoA, Rac1 dan CDC42, yang merupakan central dogma dari icon sel berjalan. Rho sendiri memiliki tiga isoforms di dalam human genome: RhoA, RhoB dan RhoC, tetapi ketiganya memiliki fungsi yang berbeda dalam keganasan. RhoA dan RhoC merupakan aktor utama dalam proliferasi dan transformasi sel menjadi ganas, sementara itu RhoB merupakan tumor suppressor gene yang akan menjadi balance dari kedua-rekannya yang lain[2].
Rho protein sangat berperan dalam meregulasi perubahan bentuk sel, polaritas dan pergerakannya melalui mekanisme kontraksi actin myosin, cell adhesion, dan microtubule dynamic [5]. Layaknya seperti manusia, sel kanker juga memiliki kerangka, otot dan indra peraba, yang kombinasi dari semuanya akan membuat sel kanker dapat berjalan ke arah yang dia inginkan
(Gambar 1).
Sementara itu RhoC diidentifikasikan oleh Merajver group (The University of Michigan CanceCente, Ann Arbo, MI, USA) sebagai marker keganasan bagi pasien kanker payudara. nflamatory breast cancer (IBC) adalah phenotype yang sangat invasive dan memiliki kemampuan metastasis yang tinggi, Merajver et al., mendapatkan bahwa RhoC terekspresi pada lebih dari 90% penderita IBC dibandingkan yang non-IBC.8 Gambar 2., menunjukan ekspresi dari Rho-family di cancer cell nest.
Uniknya dari kedua Rho protein ini, RhoA dan RhoC, tidak didapatkan kerusakan gen (mutation) didalamnya. Ekspresi yang berlebihan dari Rho-family disebabkan karena regulasi yang salah di Rho-regulatory proteinnya (yang perlu ATP untuk aktifitasnya).
Gambar 2. Ekspresi RhoA di kanker esophagus ( A) [6] dan ekspresi RhoC di IBC (B)[8]
Property Keganasan dari RhoA dan RhoC
Secara biomolekular, kedua jenis Rho protein ini memiliki 94% primary sequence yang identik (hanya berbeda 11 asam-amino saja), perbedaan dasarnya hanya terdapat di daerah C-terminal. Sedangkan pada daerah N-terminal, mengandung banyak asam amino yang mengikat GTP bersama dengan region swich-1 dan witch-2 untuk mengaktifkannya dari status GDP-bound menjadi GTP-bound, dengan kata lain N-terminal adalah daerah yang penting untuk memulai aktifitasnya.
Data-data klinis menunjukan pentingnya peranan Rho-GTPases ini, yang merangsang kami meneliti lebih jauh peranan keduanya dalam keganasan sel kanker esophagus secara in vitro dan in vivo menggunakan hewan percobaan (Gambar 3).
Apakah sel kanker itu? Secara umum sel kanker didefinisikan sebagai sel yang tidak normal, yang tumbuh serta berkembang biak secara cepat dan tidak terkendali. Sel kanker tidak peduli dengan keterbatasan zat makanan, ruang dan fakta kalau mereka harus berbagi dengan sel-sel normal yang ada disekitarnya. Lebih jauh dari pada itu, mereka mengabaikan perintah untuk berhenti berbiak oleh tubuh yang bersangkutan.
Sel tubuh yang normal juga tumbuh, membelah diri dan pada saat tertentu mereka akan mati. Akan tetapi pada sel kanker, mereka terus tumbuh, memperbanyak diri dan berusaha menghindari kematiannya (apoptsis), lebih buruknya lagi kecepatan pertumbuhan sel kanker jauh melebihi sel-sel yang normal.
Secara garis besar kanker dibagi menjadi dua kelompok, yaitu kanker jinak dan kanker ganas. Kanker jinak (benign) memiliki kecenderungan untuk tumbuh lebih lambat daripada kanker ganas (malignant) dan mereka tidak menyebar ke organ lain di dalam tubuh. Sedangkan, kanker ganas memiliki pertumbuhan sel yang sangat cepat, dapat menginvasi serta menghancurkan jaringan di sekitarnya dan pada fase tertentu akan menyebar ke organ-organ lain di dalam tubuh.
Pertanyaannya adalah, bagaimana sel kanker ini dapat tumbuh dan berjalan lebih cepat daripada sel normal, yang pada akhirnya mereka akan mencari pembuluh darah atau lymph untuk selanjutnya menyebar ke organ tertentu didalam tubuh (metastasis)?
Ada tiga tipe gen yang bertanggung jawab atas proses seperti yang tersebut diatas, yaitu: gen-gen yang jahat (oncogenes), gen-gen yang baik (tumor suppressor genes) dan gen-gen yang berfungsi memperbaiki gen lain yang rusak (mismatch-repair genes).
Sel Berjalan (The Crawling Cells)
Terbentuknya sel kanker dan kemampuannya untuk ‘berjalan’, metastasis, adalah suatu proses yang sangat kompleks, yang melibatkan banyak gen di dalamnya. Pada perjalanannya, satu sel kanker harus melepaskan diri dari kelompoknya (primary tumor) untuk mengadakan invasi ke daerah di sekitarnya, berusaha menembus pembuluh lymph atau secara langsung mencari pembuluh darah, berjuang melawan proses pertahanan tubuh (hos immune defense), berhenti di organ tujuannya dan memulai berkembang biak di lingkungan barunya (secondary tumor) [1].
Dari sekian banyak oncogene yang berperan dalam proses metastasis, Ras-superfamily dari small GTP-binding proteins merupakan yang paling banyak dipelajari. Ras-superfamily terdiri dari 130 members diantaranya Ras, Rho, Arf/Sar 1 dan Rab/Ran-subfamilies[2]. Semua aspek dari sel berjalan, invasi, termasuk didalamnya polarisasi dari sel, remodeling cytoskeletal dan penerimaan signal-signal keganasan dari luar sel dikendalikan oleh Rho-GTPases[3].
Rho-GTPases subfamily terdiri dari monomeric GTP-binding proteins dengan berat molekul rendah, ~20-30 kilo-Dalton (kDa), yang pada sel fibroblast normal juga sangat dibutuhkan untuk sel bermigrasi, akan tetapi over-ekspresi dari protein-protein ini akan merangsang sel-sel epitel untuk bermigrasi pula [4].
Rho Protein
Ada tiga kelas Rho family yang paling banyak dipelajari, RhoA, Rac1 dan CDC42, yang merupakan central dogma dari icon sel berjalan. Rho sendiri memiliki tiga isoforms di dalam human genome: RhoA, RhoB dan RhoC, tetapi ketiganya memiliki fungsi yang berbeda dalam keganasan. RhoA dan RhoC merupakan aktor utama dalam proliferasi dan transformasi sel menjadi ganas, sementara itu RhoB merupakan tumor suppressor gene yang akan menjadi balance dari kedua-rekannya yang lain[2].
Rho protein sangat berperan dalam meregulasi perubahan bentuk sel, polaritas dan pergerakannya melalui mekanisme kontraksi actin myosin, cell adhesion, dan microtubule dynamic [5]. Layaknya seperti manusia, sel kanker juga memiliki kerangka, otot dan indra peraba, yang kombinasi dari semuanya akan membuat sel kanker dapat berjalan ke arah yang dia inginkan
Gambar 1. The crawling cell (Ridley AJ. J Cell Sci. 2001; 114: 2713-22).
Rho Protein dan Kanker Hal yang paling nyata dari keterlibatan RhoA
dan RhoC dalam membuat sel menjadi ganas adalah apabila kita
mempelajarinya langsung pada pasien dengan kanker ganas. Ekspresi
berlebihan dari RhoA dan RhoC kami temukan pada pasien kanker esophagus
stadium lanjut, dimana keberadaanya berhubungan dengan parameter klinis
seperti: kedalaman invasi masa tumor, distant metastais, invasi ke
pembuluh lymph dan pembuluh darah. Disamping itu pasien-pasien yang
positif memiliki ekspresi yang berlebihan dari RhoA ini akan memiliki
prognosis yang jauh lebih buruk [6,7].Sementara itu RhoC diidentifikasikan oleh Merajver group (The University of Michigan CanceCente, Ann Arbo, MI, USA) sebagai marker keganasan bagi pasien kanker payudara. nflamatory breast cancer (IBC) adalah phenotype yang sangat invasive dan memiliki kemampuan metastasis yang tinggi, Merajver et al., mendapatkan bahwa RhoC terekspresi pada lebih dari 90% penderita IBC dibandingkan yang non-IBC.8 Gambar 2., menunjukan ekspresi dari Rho-family di cancer cell nest.
Uniknya dari kedua Rho protein ini, RhoA dan RhoC, tidak didapatkan kerusakan gen (mutation) didalamnya. Ekspresi yang berlebihan dari Rho-family disebabkan karena regulasi yang salah di Rho-regulatory proteinnya (yang perlu ATP untuk aktifitasnya).
Property Keganasan dari RhoA dan RhoC
Secara biomolekular, kedua jenis Rho protein ini memiliki 94% primary sequence yang identik (hanya berbeda 11 asam-amino saja), perbedaan dasarnya hanya terdapat di daerah C-terminal. Sedangkan pada daerah N-terminal, mengandung banyak asam amino yang mengikat GTP bersama dengan region swich-1 dan witch-2 untuk mengaktifkannya dari status GDP-bound menjadi GTP-bound, dengan kata lain N-terminal adalah daerah yang penting untuk memulai aktifitasnya.
Data-data klinis menunjukan pentingnya peranan Rho-GTPases ini, yang merangsang kami meneliti lebih jauh peranan keduanya dalam keganasan sel kanker esophagus secara in vitro dan in vivo menggunakan hewan percobaan (Gambar 3).
Gambar 3. BALB/c nude (nu/nu) mice disuntik hasil transfeksi gen RhoA dan RhoC [9].
Kami melakukan tehnik transfeksi gen (memaksa suatu sel
untuk menghasilkan gen yang kita inginkan dan dalam percobaan ini kami
menggunakan pMX-IRES-GFP yang mengandung green fluorescence potein
sebagai ekspresi vector-nya) untuk menghasilkan bentuk aktif dari RhoA,
RhoC dan bentuk non-aktif dari RhoA.
Hasil in vitro menunjukan bahwa dengan menggunakan tehnik
proliferation- dan migration-assay, bentuk aktif RhoA dan RhoC
meningkatkan kemampuan sel berbiak dan berjalan lebih cepat dari sel
yang hanya ditransfeksikan dengan bentuk non- aktifnya. Hal ini juga
terbukti pada hewan percobaan yang disuntikan bentuk aktif dari kedua
protein ini lalu dibandingkan dengan tikus kontrolnya (mock), Tabel
1[9].
Kesimpulan dari study ini, kami menemukan bahwa RhoA
lebih berperanan dalam pertumbuhan sel kanker dibandingkan RhoC,
sementara itu RhoC lebih berperan dalam menginduksi metastasis jauh
(seperti paru-paru dan liver). Aktifasi keduanya akan menyebabkan
oncogene-lain aktif bersama-sama mereka (down-stream effectors). Rho
protein berkemampuan untuk merubah sel menjadi phenotype yang lebih
ganas.
Table 1. The experimental metastatic results and primary tumor volume
Dewasa ini semakin banyak informasi yang kita ketahui
tentang penyakit keganasan, salah satunya peranan Rho-GTPases, yang
berefek dalam pertumbuhan tidak terkontrol, merangsang sel untuk
berjalan dan menyebar ke luar daerah asalnya. Pengetahuan dasar tentang
keganasan ini akan merangsang pemikiran para peneliti dan praktisi
kedokteran untuk dapat memutus mata rantai proses keganasan dan
mengembangkan obat-obatan yang dapat mentarget jalur-jalur keganasan
ini.
Daftar Pustaka:
1. Fidler I.J. Critical factors in the biology of human cancer metastasis. Cance Res 1990; 50: 6130-6138.
2. Takai Y, Sasaki T, Matozaki T. Small GTP-binding proteins. Physiol Rev 2001; 81: 153-208.
2. Takai Y, Sasaki T, Matozaki T. Small GTP-binding proteins. Physiol Rev 2001; 81: 153-208.
3. Sahai E, Marshall C.J. Rho-GTPases and cancer. Nat Rev Cancer 2002; 2: 133-142.
4. Ridley A.J, Comoglio P.M, Hall A. Regulation of
scatter factor/hepatocyte growth factor responses by Ras, Rac, Rho in
MDCK cells. Mol Cell Biol 1995; 15: 1110-1122.
5. Faried A, Nakajima M, Sohda M, et al. Role of Rho
GTPase and its malignancy potential of human ESCC cells. Presented in
the 4th International Symposium onCancer Research and Therapy (Nov
19-20, 2004, Tokyo, Japan) and the 9th Gunma Gene Transfer meeting (Jan
25, 2005, Gunma, Japan).
6. Faried A, Nakajima M, Sohda M, et al. Correlation
between RhoA overexpression and tumour progression in esophageal
squamous cell carcinoma. Eur J Surg Oncol 2005; 31: 410-414.
7. Faried A, Faried Usman N, et al. Clinical and
prognostic significance of rhoA and rhoC genes expression in esophageal
squamous cell carcinoma. Submitted: Annals of Surgical Oncology 2007.
8. Kleer C.G, van Golen K.L, Zhang Y, et al.
Characterization of RhoC expression in benign and malignant breast
disease: a potential new marker for small breast carcinomas with
metastatic ability. Am J Pathol 2002; 160: 579-584.
9. Faried A, Faried L.S, Kimura H, et al. RhoA and RhoC
proteins promote both cell proliferation and cell invasion of human ESCC
cell lines in vitro and in vivo. Eur J Cancer 2006; 42: 1455-1465.
Tidak ada komentar:
Posting Komentar